微生物实验培养皿的污染防控需贯穿‌清洗、干燥、储存、使用‌全流程，以下是具体措施及操作规范：

‌一、清洗阶段防控‌

‌1. 清洗剂选择‌

‌要求‌：使用中性或弱碱性清洗剂(pH 7-9)，避免强酸(如盐酸)或强碱(如氢氧化钠)腐蚀材质。

‌示例‌：

玻璃培养皿：可用1%洗涤灵溶液浸泡10分钟，后用纯水冲洗3次。

塑料培养皿：需用专用塑料清洗剂(如Tergazyme)，避免残留。

‌禁忌‌：禁止用含氯消毒剂(如84消毒液)直接浸泡(可能释放有毒气体)。

‌2. 清洗工具‌

‌要求‌：使用软毛刷或海绵(避免钢丝球划伤表面)。

‌操作‌：

玻璃培养皿：用软毛刷沿内壁旋转刷洗，重点清洗边缘和螺纹处。

塑料培养皿：用海绵轻擦，避免用力过猛导致变形。

‌验证‌：清洗后最后一次冲洗水需通过0.22μm滤膜过滤，滤膜无可见颗粒物即为合格。

‌二、干燥阶段防控‌

‌1. 干燥环境‌

‌要求‌：在百级无菌操作台内干燥(风速0.3-0.5m/s)，环境温度20-25℃，相对湿度≤40%。

‌操作‌：

倒扣干燥：培养皿倒扣时皿盖与皿底保留1mm缝隙(防止完全密闭形成气溶胶)。

覆盖保护：可用无菌纱布轻盖皿口(防止灰尘落入)。

‌禁忌‌：禁止在普通实验台直接暴露干燥(微生物沉降率增加300%)。

‌2. 干燥方式‌

‌自然干燥‌：

时间限制：玻璃培养皿≤2小时，塑料培养皿≤1小时。

验证：干燥后用红外测温仪确认温度与环境一致(温差≤2℃)，防止冷凝水假性残留。

‌气流辅助干燥‌：

气流过滤：使用0.22μm滤膜过滤的压缩空气或氮气。

吹扫角度：气流沿皿壁呈45°角吹入(避免直吹皿底)。

‌禁忌‌：禁止用未过滤的普通鼓风机吹扫(微生物含量超标100倍)。

‌三、储存阶段防控‌

‌1. 包装要求‌

‌要求‌：干燥后需立即密封包装，防止空气中微生物污染。

‌操作‌：

玻璃培养皿：可用无菌自封袋或铝箔纸包裹。

塑料培养皿：需用无菌塑料盒储存，盒内放置干燥剂(如变色硅胶)。

‌验证‌：包装后取样培养24小时，无菌落生长即为合格。

‌2. 储存条件‌

‌要求‌：储存在干燥、避光、无腐蚀性气体的环境中。

‌参数‌：

温度：15-25℃。

相对湿度：≤40%。

光照：≤500lux(避免紫外线直射)。

‌禁忌‌：禁止储存在潮湿环境(相对湿度60%)中(微生物生长速度加快5倍)。

‌四、使用阶段防控‌

‌1. 无菌操作‌

‌要求‌：所有操作需在无菌操作台内完成，操作人员需穿戴无菌手套、口罩和实验服。

‌操作‌：

开盖角度：打开皿盖时，皿盖与皿底呈45°角(防止空气中微生物直接沉降)。

操作时间：从开盖到关盖时间≤30秒(减少暴露时间)。

‌禁忌‌：禁止用手直接接触培养皿内壁(可能引入皮肤微生物)。

‌2. 污染监测‌

‌要求‌：定期对培养皿进行污染监测，确保无菌状态。

‌方法‌：

空白对照：取未使用的培养皿，加入无菌培养基，培养24-48小时，观察是否长菌。

环境监测：在无菌操作台内放置沉降皿(如TSA培养基)，暴露30分钟后培养，计算菌落数(≤1CFU/皿为合格)。

‌处理‌：若发现污染，需立即停止使用该批次培养皿，并追溯污染源。

‌五、特殊场景防控‌

‌1. 荧光定量培养皿‌

‌风险点‌：荧光物质易吸附微生物，紫外照射可能产生臭氧污染。

‌防控措施‌：

避光干燥：需在暗室或用铝箔包裹后干燥。

臭氧去除：干燥后用活性炭过滤器通风30分钟(臭氧浓度≤0.1ppm)。

‌禁忌‌：禁止用含汞紫外灯照射(可能破坏荧光物质)。

‌2. 低温保存培养皿‌

‌风险点‌：解冻过程可能产生冷凝水，滋生微生物。

‌防控措施‌：

梯度解冻：从-80℃取出后，需先置于-20℃ 2小时，再移至4℃ 4小时，最后室温干燥。

冷凝处理：干燥时需在皿底放置吸水纸(吸收解冻产生的水分)。

‌禁忌‌：禁止直接高温烘干(可能导致保护剂结晶)。